技術文章
TECHNICAL ARTICLES全基因合成獲得基因的途徑有兩個:一是直接利用生物體的核酸(基因組DNA或mRNA)通過PCR和RT-PCR的方法來獲取,但有的基因由于樣本和模板等原因而無法獲取;二是通過人工化學合成獲得。項目名稱基因全長(bp)實驗周期價格普通基因合成5~7天詢價1,000~2,0005~7天詢價2,000~3,0005~7天詢價長片段基因合成3,0005~7天詢價特殊序列基因合成客戶提供咨詢詢價客戶提供:填寫基因合成訂購表,提供基因名稱、長度、克隆載體、克隆位點、載體長度、載體抗性、基因序...
納米抗體制備服務安諾倫生物現已擁有較成熟的單域抗體研發技術平臺,可為客戶提供各種單域抗體庫的構建服務,包括駱駝和羊駝的免疫庫和天然庫,以及全合成庫等各種抗體庫構建,并可根據客戶需求選擇合適的篩選策略,篩選功能性單克隆單域抗體。納米抗體測序服務安諾倫生物科技有限公司可以為客戶提供一種卓yue的新型納米抗體測序服務。這項服務基于我們利用的鳥qiang法與抗體數據庫相結合的技術“DatabaseAssistedShotgunSequencing”(DASS)所搭建的專業、新型的抗體...
當回轉驗證后呈陽性結果,需要GST-PULLDOWN(非生理條件下的驗證,僅是體外驗證,);如果想進一步確定結果,可以做CO-IP,(生理條件下的驗證,結果比較可靠);IP與CO-IP的關系:IP就是用抗體把你要的蛋白免疫沉淀下來,然后去檢測它。例如蛋白A在細胞內的蛋白量不同,或者有著不同的翻譯后修飾,這是可以用A蛋白的抗體+proreinAbeads來IP,從細胞中把A拉下,再用特異的抗體(如磷酸化,泛素化抗體)來檢測A的變化。co-ip的原理和IP是一樣的,但是它檢測的是...
技術介紹:X-射線分辨單克隆抗體-抗原復合物是分析單克隆抗體識別表位的zui可靠方法,該方法基于對單克隆抗體-抗原共晶體衍射的X-射線束的強度和角度測量,再用生物信息學的方法確定原子坐標,將復合體的三維結構完整可視化。抗原表位分析對抗體人源化改造,抗體親和力提高,抗體穩定性改造,發現新的功能表位,改變抗體特異性,設計新抗體,基于抗原-抗體相互作用的立體構型設計新型功能分子改造抗體都很重要。應用該方法首先需獲得純度較高的抗原、抗體,并使其相互作用形成共晶,但由于成本及技術要求較...
miRNA的檢測Real-timePCR方法克服了由于miRNA分子太短(~22nt)帶來的定量最大難題而引入靶向特異性的反轉錄引物,該RT引物可以與成熟miRNA結合,形成反轉錄引物/成熟miRNA復合物,并在miRNA的5’末端延伸。這樣就得到一個較長的反轉錄擴增因子,為進一步做實時定量PCR提供了符合要求的摸板。檢測流程與原理:?客戶提供:提供樣品:請提供新鮮且足量的樣本,組織100~200mg,RNA模板/DNA模板5μg;提供信息:待測miRNA名稱;詳細的背景資料...
細胞自噬是指在自噬相關基因的調控下,利用溶酶體降解自身受損的細胞器及大分子物質的過程,以此維持細胞自身的需要及細胞器的更新。一、細胞自噬的基本概念及特征1、自噬的過程細胞質中的線粒體等細胞器首先被稱為“隔離膜”的囊泡所包被,這種“隔離膜”主要來自于內質網和高爾基體;囊泡逐漸閉合最終形成雙層膜結構,即自噬體,其大小約為500nm左右,囊泡內常見的包含物有胞質成分和某些細胞器如線粒體、內吞體、過氧化物酶體等;自噬體的外膜與溶酶體融合形成降解自體吞噬泡;由溶酶體內的酶降解自體吞噬泡...
蛋白定量的方法有很多種,應用較多的主要有兩種:BCA蛋白定量檢測法和Bradford蛋白定量檢測法,市售的蛋白定量試劑盒也多基于上述兩種檢測方法而開發的。兩種方法均需配制蛋白標準品,蛋白與定量試劑經過一定時間的反應(BCA法反應為37℃、20-30min,Bradford法反應一般為37℃,5min),酶標儀讀取樣品的OD值,繪制的蛋白標準曲線,依據標準曲線計算WB蛋白的濃度。兩種檢測方法筆者均有使用經驗,相比BCA法,Bradford法不僅節省反應時間,也無需配置反應試劑,...
我們在做免疫熒光(IF),激光共聚焦(Confocal),凋亡檢測(TUNEL)時,免不了要制備細胞爬片,爬片質量*決定了最后拍照的質量以及實驗數據的精準性。今天,就教大家如何制備好的細胞爬片。一.實驗材料及試劑蓋玻片、培養板、酒精燈、鑷子等;75%乙醇、DMEM*培養基(RPMI-1640*培養基)、胰酶等。二、實驗內容爬片準備:1、24*24蓋玻片,剛好用于6孔板。也可用更大的蓋玻片,放在大的培養皿中爬片。2.蓋玻片泡酸過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸...
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