人源化納米抗體制備

人源化納米抗體制備技術背景：

駱駝科動物體內會產生一種*的抗體：缺失輕鏈的重鏈抗體，通常把源于這種抗體的可變區片段成為納米抗體（Nanobody）；納米抗體具有高親和力和高特異性的特點；納米抗體為重鏈抗體的可變區部分VHH；分子量只有12~115kDa，穩定性明顯優于人抗體，納米抗體同樣含有三個CDR，其中CDR3對親和力起到主要作用；與人抗體的VH相比，納米抗體的CDR3更長，可以形成凹凸環結構，能夠深入抗原內部更好的結合抗原，因而親和力更高。此外，納米抗體的FR2的疏水殘基被親水殘基取代；水溶性更好，不容易形成聚集體。

圖一：納米抗體的原理結構示意：

人源化納米抗體制備的優勢和應用：

人源化納米抗體制備技術簡介：

VHH和人體VH的基因同源性高達80~90%，結構十分相似，都包含了3個高變區（HVR區）和4個骨架區（FR區）。通過比較發現，駱駝源VHH和人體VH之間存在微小但不容忽視的區別：它們的互補決定區（complementarity determining region,CDR）不同。VHH的CDR1和CDR3更長。VHH的CDR3長度為16-18個氨基酸，而人和小鼠的VH平均長度分別為14和12個氨基酸。另外在FR2中，人或小鼠的V37、G44、L45和W47這四個氨基酸殘基是疏水的，在進化中相當保守；在VHH中，它們突變為親水性的氨基酸殘基F37、E44、R45、G47。因此將人源抗體VH結構域FR2中一些氨基酸進行VHH特征改造，或者將VHH抗體進行人源化改造，可以獲得更好的穩定性、溶解性以及生物活性。

艾柏森公司服務：

艾柏森生物提供人源納米抗體以及納米抗體人源化改造服務。艾伯森生物提供基于人單域抗體骨架構建的人單域抗體合成抗體展示文庫，針對特異性靶點快速篩選人源或者人源化納米抗體。另外，利用特殊的轉基因免疫系統人源化小鼠，通過針對免疫構建人源免疫納米抗體庫，可以篩選到更高親和力的人源納米抗體。

人源化納米抗體制備篩選流程：