雜交瘤細胞系

雙特異性抗體（bispecificantibody,BsAb）,擁有兩個不同的抗原結合位點，從而同時與兩個靶抗原結合，在發揮抗體靶向性的同時，介導另外一種特殊的功能，例如一個結合靶細胞上的特異抗原，另一個結合淋巴細胞或者吞噬細胞等效應細胞，從而在腫瘤診斷及治療過程中發揮傳統抗體*的優勢。雙特異性抗體是一種工程化的抗體類蛋白產物，在自然情況下是不會產生的，只能通過化學或者生物學的方法來制備，利用DNA重組及細胞融合的技術來實現。通過雜交瘤細胞系來制備雙特異性抗體是早使用的一種方法，在目前也常用來制備單克隆抗體藥物開發。但是這種技術有天然的缺陷，由于重鏈和輕鏈的隨機重組，兩種針對不同抗原的抗體重組有以下10種形式，但只有一種是需要的。

艾柏森生物提供雙特異性抗體定制服務，可以滿足客戶不同的需求。

技術流程

1.　選擇標記物的引入：雜交瘤細胞系需要引入突變以便篩選。HAT敏感的雜交瘤細胞能在含有8-氮鳥嘌呤藥物的培養基中存活。

2.　流式細胞儀篩選雜交瘤細胞

3.　細胞融合：使用聚乙二醇或者電誘導細胞融合。

4.　從雜交瘤培養液中篩選特異性抗體：ELISA，流式細胞儀和細胞毒性是常用的篩選方法

5.　克隆：篩選穩定分泌bsAb的細胞系，再進行單克隆細胞培養，常用的方法為有限稀釋法。

6.　雙特異性抗體的純化：通常使用蛋白A或蛋白G親和色譜法與離子交換色譜或排阻色譜合并來純化雙特異性抗體，bsAb的純度可以通過SDS-PAGE，等電聚焦，Western-blot，同型特異性的ELISA來評估。