蛋白表達(dá)系統(tǒng)的含義及主要構(gòu)成分析

　　蛋白表達(dá)一般由以下幾個(gè)部分組成：

　　1.宿主：表達(dá)蛋白的生物體。可以為細(xì)菌、酵母、植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞等。由于各種生物的特性不同，適合表達(dá)蛋白的種類也不相同；

　　2.載體：載體的種類與宿主相匹配。根據(jù)宿主不同，分為原核（細(xì)菌）表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、植物表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體、昆蟲表達(dá)載體等。載體中含有外源基因片段。通過載體介導(dǎo)，外源基因可以在宿主中表達(dá)；

　　3.輔助成分：有的表達(dá)系統(tǒng)中還包括了協(xié)助載體進(jìn)入宿主的輔助成分。比如昆蟲-桿狀病毒表達(dá)體系中的桿狀病毒。

　　對(duì)于一個(gè)蛋白來說：

　　首先了解該蛋白的基本信息，獲得序列信息，了解構(gòu)成情況。

　　然后再對(duì)蛋白序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析：

　　1.是否含有稀有密碼子；

　　2.是否有二硫鍵；

　　3.是否含有信號(hào)肽；

　　4.磷酸化和糖基化位點(diǎn)。

　　再構(gòu)建載體在不同的菌株中表達(dá)，同時(shí)嘗試不同的誘導(dǎo)條件，包括：誘導(dǎo)時(shí)OD值、誘導(dǎo)溫度、誘導(dǎo)時(shí)間、分析表達(dá)結(jié)果。同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌生長曲線作圖，觀察目的蛋白對(duì)宿主菌是否有毒害作用。通過終的表達(dá)結(jié)果分析過程。