技術服務 膜蛋白抗體制備服務

對于絕大多數(shù)的可溶性蛋白抗原，我們可以制備全長的蛋白抗原以免疫動物制備抗體，但是對于那些依托雙脂層膜結構建立起來的多次跨膜蛋白，抗體的制備就沒那么簡單了。比如G蛋白偶聯(lián)受體（GPCR）蛋白就是一個典型的大型、多次跨膜的重要蛋白家族，它是許多疾病的病理信號參與者，同時也是近一半現(xiàn)代藥物的作用靶點。然而要想制備GPCR的抗體確實非常困難，這主要有兩方面因素造成，一是眾多的跨膜區(qū)間造成蛋白的一級結構被分割成彼此間隔在細胞膜內(nèi)外兩側(cè)的多個區(qū)域，而人為去掉這些結構則會造成蛋白構象喪失原有形態(tài)；二是表達量極低，由于作為膜通道，在細胞信號轉(zhuǎn)導中發(fā)揮關鍵作用，人為過表達外源的GPCR，會導致細胞信號紊亂，極易造成細胞死亡，所以我們很難制備得到采用全蛋白所需的少蛋白計量。

　　艾柏森生物通過多年的項目實踐經(jīng)驗，積累了數(shù)種多次跨膜蛋白抗體制備方法，包括經(jīng)典的可溶區(qū)蛋白設計方案，重組蛋白免疫方案，以及公司技術人員開發(fā)的基于全細胞免疫的抗體制備方案，以小的試驗風險，獲得優(yōu)品質(zhì)的抗體，為客戶量身打造好的抗體制備思路。

★　服務組合

★　經(jīng)典案例（兩次跨膜蛋白抗體制備 Twice Transmembrane antibody service）

HeLa cells weretransfected with plasmids encoding FUNDC1–Myc for the indicated times and themitochondrial (TIM23, TOM20, VDAC1), endoplasmic reticulum (calnexin) and Golgimarker (GM130) proteins were detected by western blotting.